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第一章　概论1

一、分光光度法1

目录1

二、紫外可见分光光度计2

参考文献4

第二章　分光光度法基础5

第一节 电磁辐射的基本性质5

一、电磁辐射的粒子说和波动说5

二、电磁辐射波段的能量范围和各种波谱法6

三、紫外可见吸收光谱的形成7

一、比耳定律及其数学表达式9

第二节 定量分析的理论基础—比耳定律9

二、影响比耳定律偏离的主要因素10

三、比耳定律的局限性与可靠性12

参考文献15

第三章　紫外可见分光光度计的基本结构16

第一节 仪器分类16

一、单光束紫外可见分光光度计16

二、准双光束紫外可见分光光度计17

三、双光束紫外可见分光光度计18

四、双波长紫外可见分光光度计20

第二节 电光源系统21

一、光源（灯泡）22

二、电源24

第三节 外光路系统29

一、外光路系统的组成29

二、外光路系统的形式29

第四节 分光系统30

一、光栅30

二、准直镜36

三、物镜36

四、单色器36

二、聚光透镜41

三、比色皿41

第五节 光度室系统41

一、光度室盖41

四、比色皿架45

第六节 光电转换系统45

一、外光电效应光电转换器46

二、内光电效应的光电转换器52

第七节 放大器系统57

一、前置放大器57

二、主放大器58

三、双端输入的对数放大器58

参考文献60

第八节 数据处理、打印输出系统60

第四章　仪器的技术指标、测试方法及其对分析误差的影响62

第一节 光度准确度62

一、光度准确度的表示方法62

二、影响光度准确度的主要因素65

三、吸光度准确度和透射比准确度的关系65

四、光度准确度测试方法67

五、与光度准确度有关的几个重要问题69

第二节 光度重复性71

一、光度重复性的测试方法71

一、杂散光的重要性72

二、影响光度重复性的主要因素72

第三节 杂散光（Stray light）72

二、杂散光的定义及理论推导73

三、杂散光对仪器分析测试误差的影响75

四、杂散光的来源79

五、杂散光的测试方法和测试材料79

六、与杂散光测试有关的几个问题82

第四节 光度噪声84

一、光度噪声对分析测试误差的影响84

一、基线平直度的重要性（对分析测试误差的影响）87

第五节 基线平直度87

二、光度噪声的表示方法87

三、光度噪声的测试方法87

二、基线平直度的测试方法88

三、影响基线平直度的主要因素88

四、正确认识及使用基线平直度89

第六节 光谱带宽（Spectra band width——SBW）91

一、光谱带宽的重要性（对分析测试误差的影响）91

二、光谱带宽对分析误差的理论推导93

三、光谱带宽的测试方法95

四、应用实例96

一、稳定性对分析测试误差的影响97

二、紫外可见分光光度计稳定性的测试方法97

第七节 稳定性（Stability）97

五、结论97

第八节 波长准确度和波长重复性98

一、波长准确度对分析测试误差的影响98

二、波长准确度的测试方法99

三、波长重复性103

第九节 紫外可见分光光度计的线性103

一、线性的定义103

二、线性对分析测试误差的影响103

三、仪器线性的测试方法104

四、线性和准确度的关系107

一、线性动态范围的定义和重要性108

第十节 线性动态范围108

第十一节 分析测试的总误差及其估算方法109

二、线性动态范围的测试方法109

参考文献111

第五章　仪器的评价和挑选113

第一节 适用性114

第二节 可靠性115

一、可靠性的定义115

二、影响可靠性的因素117

第三节 智能性（自动化）118

第四节 经济性119

一、经济性的内容119

第五节 美学性120

二、经济性的评估120

第六节 工艺性121

参考文献123

第六章　如何选择仪器及有关的最佳条件124

第一节 溶剂的选择124

第二节 分析波长选择125

第三节 吸光度范围选择126

第四节 光谱带宽的选择127

第五节 线性动态范围的确定128

第六节 注意防止试样的光解129

三、如何解决比色皿沾污的问题130

二、鉴别比色皿被沾污的方法130

第七节 比色皿的沾污问题130

一、重视比色皿的沾污问题的严重性（对分析测试误差的影响）130

参考文献131

第七章　紫外可见分光光度计的应用132

第一节 定量分析132

一、定量分析方法132

二、定量分析应用举例134

第二节 定性分析139

一、利用标准物质定性139

二、用波长位置判断有机化合物的生色基团139

第三节 纯度检查141

第四节 结构分析142

一、判别异构体142

二、推测化合物的分子结构143

第五节 有机分析中的应用144

一、利用标准曲线法测未知化合物的含量145

二、利用特征吸收峰法鉴别有关物质145

三、利用紫外光谱谱图的方法鉴别有机化合物146

四、利用π键反应减小干扰146

参考文献146

三、仪器向小型化（或微型化）、数字化、便携式的方向发展148

二、重视适用附件的开发148

第八章　仪器及应用的最新进展148

第一节 紫外可见分光光度计仪器的最新进展148

一、仪器的自动化程度大大提高148

四、仪器向多功能方向发展151

五、新型的紫外可见分光光度计不断涌现151

第二节 紫外可见分光光度计应用的最新进展153

一、多组织不经分离，直接测量153

二、联用技术153

三、积分光度法进入复兴时期154

参考文献154

第二节 紫外可见分光光度计对环境的要求156

第九章　仪器的日常维护、常见故障诊断及排除方法156

第一节 对电源的要求156

第三节 仪器的日常保养、维护157

一、经常开机157

二、经常校验仪器的技术指标157

三、保持机械运动部件活动自如157

第四节 常见故障诊断、排除方法158

一、常见的故障及其排除方法158

二、计算机常见故障及排除方法161

第一节 重铬酸钾标准溶液的配制162

一、酸性重铬酸钾标准溶液配制方法162

第十章　仪器质量指标检测常用的标准物质、标准光源162

二、碱性铬酸钾标准溶液配制方法163

第二节 硫酸铜标准溶液配制方法164

第三节 NaI标准溶液和NaNO2标准溶液的配制165

一、NaI标准溶液的配制方法166

二、NaNO2标准溶液的配制方法166

第四节 低压汞灯的特征谱线和能量分布166

第五节 氧化钬玻璃的特征谱线和能量分布167

一、氧化钬玻璃的特征谱线167

二、氧化钬玻璃的能量分布167

二、能量分布168

第六节 氧化钬溶液的特征谱线和能量分布168

一、特征谱线168

第七节 氘灯的特征谱线169

第八节 高压汞灯的特征谱线169

第九节 苯蒸气的吸收光谱170

参考文献170

附录一 国内外主要高档紫外可见分光光度计一览171

附录二 国内外主要中高档紫外可见分光光度计一览172

附录三 国内外主要中低档紫外可见分光光度计一览173

附录四 国内外主要普及型紫外可见分光光度计仪器一览174

附录五　有关的其他重要资料175